Hei acolo! Sunt un furnizor de bioreactoare și astăzi vreau să vă împărtășesc cum să recoltați celule dintr-un bioreactor. Este un pas crucial în multe bioprocese, fie că lucrați la produse farmaceutice, biocombustibili sau doar faceți niște cercetări interesante.
În primul rând, să vorbim despre motivul pentru care recoltarea de celule este atât de importantă. Când creșteți celule într-un bioreactor, practic creați un mic ecosistem în care celulele pot prospera și își pot face treaba. Dar, la un moment dat, trebuie să scoți acele celule, astfel încât să le poți folosi pentru oricare ar fi scopul tău final. Poate că extrageți o proteină valoroasă pe care au produs-o sau le folosiți pentru a face un nou lot de ceva. Oricare ar fi, recoltarea corectă a celulelor este cheia pentru a obține rezultate bune.
Pregătirea înainte de recoltare
Înainte de a vă gândi măcar la recoltarea celulelor, trebuie să vă asigurați că totul este configurat corect. Verificați condițiile bioreactorului. Vrei să știi densitatea celulelor, viabilitatea și starea generală de sănătate a culturii. Puteți folosi un microscop sau niște contoare de celule automate de lux pentru a obține aceste informații. De asemenea, asigurați-vă că toate echipamentele dvs. de recoltare sunt curate și gata de funcționare. Aceasta include lucruri precum centrifuge, filtre și vase de colectare.
Dacă utilizați unul dintre noiȚesut vegetal Cultură celulară Fotobioreactor de sticlă, este conceput pentru a vă oferi o vedere clară asupra culturii celulare din interior. Puteți monitoriza cu ușurință creșterea și puteți decide când este momentul potrivit pentru recoltare. Construcția din sticlă face, de asemenea, ușor de curățat și sterilizat, ceea ce este foarte important pentru a preveni contaminarea.
Metode de recoltare
Există câteva moduri diferite de a recolta celule dintr-un bioreactor, iar metoda pe care o alegeți depinde de câțiva factori, cum ar fi tipul de celule pe care le creșteți, amploarea operațiunii și utilizarea finală.
Centrifugarea
Centrifugarea este una dintre cele mai comune metode. Funcționează prin rotirea culturii celulare la viteze mari, ceea ce face ca celulele să se separe de mediul lichid. Celulele mai grele se scufundă în partea de jos a tubului de centrifugare, formând o pelită, în timp ce lichidul mai ușor (supernatantul) rămâne deasupra.
Pentru a face acest lucru, mai întâi transferați cultura celulară din bioreactor în tuburi de centrifugă. Asigurați-vă că echilibrați corect tuburile în centrifugă pentru a evita orice accident. Apoi, setați viteza și timpul corespunzătoare pentru centrifugare. Acest lucru poate varia în funcție de tipul de celulă. De exemplu, celulele de mamifere ar putea avea nevoie de o viteză mai mică în comparație cu celulele bacteriene.
Odată ce centrifugarea este finalizată, îndepărtați cu atenție supernatantul. Puteți folosi o pipetă sau pur și simplu o turnați ușor. Peletul celular din partea de jos este ceea ce căutați. Puteți apoi resuspenda celulele într-un nou tampon sau mediu pentru procesare ulterioară.
Dacă lucrați la o scară mai mare, puteți utiliza o centrifugă cu flux continuu. Acestea sunt excelente pentru aplicațiile industriale în care trebuie să procesați rapid un volum mare de cultură celulară. NoastreBioreactor foto-luminos paralel din oțel inoxidabilpoate fi integrat cu ușurință cu un sistem de centrifugare cu flux continuu, făcând procesul de recoltare mai eficient.
Filtrare
Filtrarea este o altă opțiune, în special pentru celulele care sunt sensibile la forțele de forfecare. În această metodă, treceți cultura celulară printr-un filtru cu pori suficient de mici pentru a prinde celulele în timp ce permiteți trecerea mediului lichid.
Există diferite tipuri de filtre pe care le puteți utiliza, cum ar fi filtre cu membrană sau filtre de adâncime. Filtrele cu membrană sunt mai precise și vă pot oferi o separare foarte curată, dar se pot înfunda și cu ușurință. Pe de altă parte, filtrele de adâncime pot gestiona mai multe resturi și sunt mai bune pentru operațiuni la scară mai mare.
Când utilizați filtrarea, trebuie să vă asigurați că filtrul este instalat corect și că nu aplicați prea multă presiune, ceea ce ar putea deteriora celulele. De asemenea, ar putea fi necesar să pre-tratați cultura celulară pentru a îndepărta orice particule mari care ar putea înfunda filtrul.
Floculare
Flocularea este o metodă prin care adăugați un agent chimic la cultura celulară pentru a face celulele să se aglomereze. Aceste aglomerări sunt apoi mai ușor de separat de mediul lichid. Această metodă este adesea folosită pentru recoltarea celulelor microbiene.
Agentul de floculare poate fi un polimer sau o sare. Trebuie să controlați cu atenție cantitatea de agent pe care o adăugați, deoarece prea mult poate avea un impact negativ asupra celulelor. Odată ce celulele au floculat, puteți folosi fie centrifugare, fie filtrare pentru a separa aglomerările de lichid.
Manipulare post-recoltare
După ce ați recoltat celulele, trebuie să le manipulați cu atenție pentru a le menține viabilitatea și funcționalitatea. Dacă nu veți folosi celulele imediat, poate fi necesar să le stocați. Puteți îngheța celulele într-o soluție crioprotectoare la temperaturi foarte scăzute. Acest lucru ajută la prevenirea formării cristalelor de gheață, care pot deteriora celulele.
De asemenea, trebuie să analizați celulele recoltate pentru a vă asigura că respectă standardele dumneavoastră de calitate. Aceasta poate implica testarea viabilității celulare, conținutului de proteine sau alți parametri relevanți.
Depanare
Uneori, lucrurile nu merg așa cum a fost planificat în timpul recoltării celulelor. Iată câteva probleme frecvente și cum să le remediați:
- Recuperare scăzută a celulelor: Acest lucru se poate datora centrifugării sau filtrării necorespunzătoare. Verificați setările echipamentului dvs. și asigurați-vă că celulele nu se pierd în acest proces. De asemenea, poate fi necesar să ajustați metoda de recoltare dacă celulele sunt prea fragile.
- Contaminare: Dacă observați semne de contaminare, cum ar fi culori sau mirosuri neobișnuite în celulele recoltate, este posibil ca echipamentul dumneavoastră nu a fost sterilizat corespunzător. Asigurați-vă că curățați și sterilizați toate echipamentele înainte și după fiecare utilizare.
- Deteriorarea celulelor: Forțele tăietoare în timpul centrifugării sau filtrării pot deteriora celulele. Încercați să reduceți viteza sau presiunea pentru a minimiza acest lucru. De asemenea, puteți utiliza o metodă de recoltare mai blândă, cum ar fi flocularea.
Concluzie
Recoltarea celulelor dintr-un bioreactor este un proces în mai multe etape care necesită o planificare și o execuție atentă. Alegând bioreactorul potrivit, ca al nostruȚesut vegetal Cultură celulară Fotobioreactor de sticlă,Bioreactor foto-luminos paralel din oțel inoxidabil, sauSistem pilot de bioreactor în stare solidă, și metoda de recoltare adecvată, puteți asigura o recoltare reușită a celulelor.
Dacă sunteți interesat să aflați mai multe despre bioreactoarele noastre sau aveți întrebări despre recoltarea de celule, nu ezitați să contactați. Suntem aici pentru a vă ajuta cu toate nevoile dumneavoastră de bioprocesare. Indiferent dacă sunteți un mic laborator de cercetare sau o mare instalație industrială, avem bioreactorul potrivit pentru dvs. Contactați-ne pentru a începe o conversație despre cerințele dumneavoastră specifice și haideți să lucrăm împreună pentru a vă atinge obiectivele de bioprocesare.
Referințe
- Smith, J. (2018). Operațiuni cu bioreactor: principii și practici. Presa Academică.
- Jones, A. (2020). Tehnici de cultură celulară. Wiley - Blackwell.
- Brown, C. (2019). Manual de bioprocesare. CRC Press.